J Mater Sci Mater Med 2004 15 (4):493–6 p. 31) Hamilton, R. F., Jr. Wu, N. Porter, D. Buford, M. Wolfarth, M. Holian, A. Particle length-dependent titanium dioxide nanomaterials toxicity and bioactivity.


Чтобы посмотреть этот PDF файл с форматированием и разметкой, скачайте его и откройте на своем компьютере.
1


2


РЕФЕРАТ

Ключевые слова:
РЕГЕНЕРАЦИЯ ПЛАНАРИЙ, МЕТОД
ПРИЖИЗНЕННОЙ МОРФОМЕТРИИ, НЕОБЛАСТЫ.


Исследовано воздействие биосовместимых магнитных наночастиц
серебра (
Ag
) на регенерацию планарий двух видов
Schmidtea mediterranea
(трисомики) и
Dugesia tigrina
мет
одом прижизненной морфометрии
.
Параллельно изучены необласты планарий


клетки ответственные за
регенерацию, а также был проведен гистологический анализ бластемы
регенерирующих триклад.

Обнаружено, что магнитные наночастицы имеют разное воздействие на
реге
нерацию планарии
Schmidtea mediterranea
, выступая при одних
концентрациях, как ингибиторы процесса регенерации бластемы, а при более
низких концентрациях играя роль активаторов пролиферации.

Установлено, что выбранные концентрации магнитных наночастиц в
эк
сперименте с видом
D. tigrina

не оказывают значительного воздействия на
модельный объект, а более высокие концентрации оказываются летальными.

Выделены необласты планарий вида
Dugesia tigri
na на разных стадиях
клеточного цикла: типичный необласт в покоящем
ся состоянии; необласт на
стадии деления клеточного ядра; формирующий клетки паренхимы;
формирующий эпителиальную ткань.







Выпускная квалификационная работа изложена на 53 страницах, содержит 16
рисунков, 7 таблиц, список литературы 62 источника.

3


СОД
ЕРЖАНИЕ



Введение………………………………………………………………...…..…

5

1

Обзор литературы………………………………………………………..…...

8


Экспериментальная часть…………………………………………………….

1
4

2

Материалы и методы……………………………………………………..…..

1
4


2.1.

Условия содержания планарий…………………………………..…….

1
4



2.1.1.

Содержание культуры планарий………………………….…..

1
4



2.1.2.

Кормление планарий………………………………………......

1
4


2.2.

Принципы и этапы проведения эксперимента…………………..........

1
5



2.2.1.

Принцип метода прижизненной компьютерной
морфометрии…………………………………………
………...

1
5



2.2.2.

Концентрации…………………………………………...…..…

1
7



2.2.3.

Характеристика раствора наночастиц…………..………........

1
8



2.2.4.

Операция декапитации планарий…...………………………..

1
8



2.2.5.

Регистрация отрастания бластемы методом компьютерной
морфометрии
…………………………………………….....…..

1
9



2.2.6.

Анализ электронных изображений регенерирующих
планарий…………………………………………………......…

1
9



2.2.7.

Определение критерия регенерации и величины эффекта
действия препарата……………………………………………

20



2.2.8.

Статистическая обработ
ка результатов эксперимента…..….

2
1


2.3.

Методика приготовления гистологических препаратов………..…....

2
1


2.4.

Выделение необластов планарий……………………………………..

2
3


2.5.

Систематическое положение планарий
…………………………..………

2
5

3

Результаты и обсуждения……………………
……………………………....

2
6

4



3.1.

Пролиферация у планарий вида
Schmidtea mediterranea
…………….

2
6


3.2.

Гистологические анализ бластемы планарии вида
Schmidtea
mediterranea
…………………………………………………………….

30


3.3.

Пролиферация у планарий вида
Dugesia tigrina
……………………..

3
2


3.4.

Выделение необластов планарий……………………………………..

38


Выводы…………………………………………………………………….......

41


Список использованных источников……………………...
………….……..

42


Приложение…………………………………………………………………...

48





















5


ВВЕДЕНИЕ


Планарии

(Tricladida)


отряд плоских червей, относящийся к классу
ресничных червей (Turbellaria).
Планарии характеризуются очень высокой
регенерационной способностью и довольно простой организацией

(Дыганова

с
соавт.
, 1990;

Иванов

с соавт.
, 1973, 1981;
Порфирьева с соавт.
, 1987)
.
В

настоящее время
они
являются

широко используемой тест
-
системой,
позволяющей изучать регенерационные
явления не только на уровне
фено
менов, но и на клеточном уровне.
Регенерирующие планарии
являются
удобной моделью
для изучения биологического действия р
азличных веществ и
экологических факторов.

В последни
е годы увеличилось количество работ посвященных
изучению воздействия

магнитных наночастиц
на различные биологические
объекты

(далее по

тексту


магнитные частицы)

(
Amiard
e
t

al
.
, 2006;
Brunner et
al
.
, 20
.
, 2007;

Gupta et al
.
.
, 2009; Harush
-
.
, 2007;

Javier Garcí
a
-
Alonso


al
.
, 2011;
Ma, 2008;
Moore


al
.
, 2006;

Minullina et al
.
, 2011;
Navarro


al
.
, 2008;
NeenuSingha


al
.
, 2010;
Pankhurst


al
.
, 2
003;
Ringwood


al
.
, 2010;
Thomas

al
.
, 2007;
Wang

al
., 1999;
Wilhelm


al
.
, 2003, 2002;

Zhang


al
.
, 2002).
В практическом плане подобные работы
позволяют исследовать очень широкий спектр проблем, таких как:
структурированность функциональной поверхности живых клеток, изучение
клеточного обмена, а также помочь при изготовлении цельноклеточных
биосенсоров.
Соврем
енные исследования

свиде
тельствуют о широких
перспективах практического использования магнитных наноматериалов

благодаря появлению у вещества

в наноразмерном состоянии уникальных
свойств,
к
оторых не было ранее и которые
невозможно предсказать, ис
ходя из
ст
роения и свойств исходного вещества (
Першина с соавт
., 2008).

В настоящее
время на основе наночастиц разрабатывают высокoспецифичные
диа
гностические системы и эффектив
ные методы терапии
, в частности, для
6


целевой доставки препаратов

и
управляемой локальной
гипертермии раковых
опухолей

(Поляков с соавт., 2010)
.
Наночастицы, обладающие магнитными
свойствами,
представляют значител
ьный интерес для медицины, что
связано с
возможность
ю дистантного управления ими и
конструкциями на их осн
ове при
наложении внешнего
маг
нитного поля

(Першина с соавт., 2008).

Осаждение
магнитных наночастиц на живые клетки, учитывая разнообразие живых
организмов, предлагает неограниченный диапазон потенциальных применений.
В связи со всем вышеперечисленным, необходимо сделать вывод, что

исследование воздействия магнитных наночастиц на

живые организмы

является актуальной проблемой.

В насто
ящей работе нами было проведено изучение

пролиферативной
активности магнитных наночастиц серебра (Ag) на регенерацию
двух
модельных объектов


планарий
вида
Schmidtea
m
editerranea

и

D
ugesia

tigrina

(Plathelminthes, Tricladida).

Параллельно с этим нами были изучены необласты
планарий


клетки ответс
твенные за регенерацию, а также был проведен
гистологический анализ бластемы регенерирующих триклад
.

Выбор об
ъектов
исследования связан с т
ем, что подобные работы ранее

не проводились.
Лабораторная культура планарий
S. mediterranea

и

D
.
tigrina

является в
высокой степени популярным модельным объектом в различных
биологических исследованиях
всевозможных направлен
ий
. Использование
триклад
S. mediterranea

и
D
.
tigrina

обусловлено относительной простотой их
культивирования и содержания.

В связи со всем вышеперечисленным,
целью

данной работы является
исследование воздействия биосовместимых магнитных частиц на регенер
ацию
планарии
S. mediterranea

и
D
.
tigrina
.

Для достижения этой цели решались
следующие
задачи:



Проанализировать литературные

ис
точники

по вопросу
регенерации у
планарий.

7




Осуществить к
ультивирование лабораторных планарий
S.
mediterranea

и
D
.
tigrina
.



Прове
сти экспериментальную часть

методом прижизненной
морфометрии
.



Определить

концентрации

магнитных наночастиц
,

влияющих на
пролиферацию

планарий.



Выделить и провести анализ необластов планарий
S. mediterranea
и
D
.
tigrina
.






















8


1.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУ
РЫ


Работы по изучению регенерации у планарии ведутся на протяжении
более ста лет. Многие известные ученые, в том числе Томас Хант Морган
(Morgan, 1898), исследовали механизмы, лежащие в основе процесса
регенерации, который до сих пор остается еще до конца

не понятым явлением.

В представлении
,

ставшим уже классическим
,

необлас
ты

-

это
тотипотентные стволовые клетки, которые являются основным компонентом,
из которого формируется регенерирующая почка или бластема. Дискуссия о
©тотипотентностиª необластов до с
их пор является актуальной (
Bosh
, 2008
)
;
[National Institutes of Health, 2001]
.
©Тотипотентныеª

клетки могут дать начало

всем типам клеток, включая зародышевые клетки. Клетки, которые не
обладают возможностью дифференцироваться в зародышевые клетки, но мог
ут
дифференцироваться в любой тип
соматических клеток, называются
©плюрипотентнымиª клетками.

Другой проблемой терминологии является использование термина
"необласты". Недавние исследования, использующие методы молекулярной
маркировки, а также методы прот
очной цитометрии
,

показали неоднородность
популяции необластов (Sato et al., 2006; Higuchi et al., 2007).

Таким образом,
можно констатировать, что проблема в классификации необластов является
актуальной и до конца не разрешенной.

Необласты впервые были оп
исаны Рэндольфом (1897) и повторно Дюбуа
(1949). Рэндольф описывал, что это веретенообразные базофильные клетки,
могут наблюдаться во время регенерации, мигрируя к ране и участвуя в
строительстве регенерирующей бластемы.
Дюбуа обнаружил, что эти клетки

чув
ствительны к рентгеновскому облучению, и теряют способность к
регенерации после него. В конце 19
-
го века Томас Хант Морган показал, что
кусочек планарии, соответствующий 1/279 ее тела может успешно восстановить
9


все тело планарии (Morgan, 1898). Этот вывод
убедил ученых, что
©плюрипотентныеª стволовые клетки присутствуют во всем теле планарии.

Педерсен (1959) исследовал необласты при помощи электронного
микроскопа (EM). Морфологически необласты имеют много признаков, по
которым их можно объединить с недиффер
енцированными клеткам других
организмов
-

это небольшое количество цитоплазмы и большое ядро со
значительным количеством деконденсированной ДНК. Ветцель (1961)
описывал необласты, которые находились в покое и не мигрировали к ране
,

т.е.
не участвовали в пр
оцессе дифференциации в бластеме. Он описа
л их как
клетки округлой формы

с яйцевидным ядром.

Необласты обладают одной
примечательной особенностью
-

наличием
электронно
-
плотной мембраны и хроматоидных тел в их цитоплазме (Hori,
1982; Auladell et al., 1993)
. Хроматоидные тела начинают уменьшаться в
размере в течение дифференцировк
и всех

регенерирующих клеток, тем не
менее, полностью они не исчезают в процессе регенерации (Hori, 1982; 1997).

Классические исследования Вольфа и Дюбуа продемонстрировали роль
не
областов в процессе регенерации (Wolff,
Dubois
, 1948). Их исследование
показало, что планарии теряют способность к регенерации после
рентгеновского облучения. Бы
ло выявлено, что необласты
особенно
чувствительны к облучению: после утраты необластов

планария

теряет
способность к регенерации.

В 1980 году было опубликовано несколько работ по трансплантации
необластов (Baguà et al., 1989). В исследованиях были осуществлены попытки
концентрации необластов и последующий перенос их в тело планарии после
рентгеновс
кого облучения. В процессе исследования пересаживали смесь,
состоящую из разнородных клеточных популяций. По завершению
экспериментов было сделано заключение, что необласты являются

отипотентными" стволовыми клетками
, также был сделан вывод,
что
10


миграция

необластов


это
не активная миграция в сторону бластемы, а
распространение клеток за счет пролиферации.

Многие исследователи пытались выделить культуру клеток из необластов
планарий, но никому не удалось индуцировать их пролиферацию ©
in

vitro
ª
(Teshirog
i, Ishida, 1987). Одной из причин этого является то, что
фрагментированные клетки выделяют много протеаз и токсичных материалов,
убивая при этом необласты.

Фактически историю изучения необластов можно разделить на несколько
основных этапов. В период 1890
-
1940
-
х годов необласты определялись как
недифференцированные блуждающие клетки неясного происхождения с
основной, хотя и неопределенной, роли в регенерации. В 1940
-
1960
-
х годах
учёные
пришли к выводу, что необласты


недифференцированные клетки,
находящиес
я в состоянии покоя, чья основная функция заключается в создании
бластемы во время процесса регенерации. В 60
-
80
-
х годах ХХ века была
сформулирована клеточная теория дедифференцировки, в которой необласты
определяли как временные, недиффер
енцированные клет
ки, возникающие

при
дедифференцировке дифференцированных клеток. Начиная с конца 1970
-
х
годов необласты определяются как ©о
сновные ячейки для регенерацииª

и
играют важную роль в качестве соматических стволовых клеток для
ежедневного износа тканей, а также
в каче
стве источника половых клеток. На
современном

этап
е были проведены

исследования
, где с помощью инъекции
одиночных необластов у летально облученных планарий возобновляли
митотическую активность бластемы и достигали полного выживани
я объектов
исследов
ания (Baguna


al
., 1989; Baguna, 2012). Исследование необластов
планарий вида
Dugesia tigrina
показало, что бластема планарий формируется
путем местной миграции ранних накоплений недифференцированных клеток.
Полученные результаты
доказали
, что формирован
ие бластемы планарий
происходит через механизмы, отличающиеся от механизмов образования
классических эпиморфных моделей регенерации (Annelida, Insecta,
Amfibia
).
11


Исследователи предположили, что регенерация планарий возможно
представляет собой п
ромежуточную

ступень между морфол
актической и
эпиморфной регенерациями (Baguna,
Salo
, 1984) .

Известно, что не все виды планарий способны к регенерации, не
регенерируют, например, молочно
-
белая планария и некоторые байкальские
эндемики (Шейман с соавт., 2010). Кроме т
ого, не всегда регенерация
сопровождается образованием бластемы (
Nentvig
, 1978).
Значительный пласт
работ посвященных изуч
ению регенерации планарии опирает
ся на факты
восстановления различных фрагментов планарий, их глотки, глаз и кожно
-
мышечного мешка (Se
ngel, 1959; Wolff, 1962; Ziller, 1973).

Опыт использования планарий в качестве модельных объектов по
изучению воздействия на степень регенерации также насчитывает не один
десяток лет. Ранние работы по изучению пролиферации в фармакологическом
скрининге баз
ировались на фиксации факта появления глаз у регенерирующих
планарий (Lenicque, Tchapajeva, 1969).

Метод прижизненной морфометрии, который используется в нашем
исследовании, был разработан и впервые применен в работе Х.П. Тираса и
Н.Ю. Сахаровой (1984)
,
в

которой морфологические параметры
сфотографированных планарий измеряли с помощью линейки. В дальнейшем
метод был усовершенствован в связи с появлением нового программного
обеспечения и оборудования (Тирас, Хачко, 1990; Шейман с соавт., 2004). Этот
метод я
вляется высокочувствительным, выявляющим соответствующее
свойство тестируемого вещества на уровне целостного организма, и
обеспечивает высокую надежность получаемых результатов.

Метод также может быть применен при скрининге лекарственных
препаратов


поте
нциальных регуляторов (стимуляторов и ингибиторов)
пролифер
ации. Кроме того, он позволяет
оценить возможное токсическое
действие нового фармакологического вещества на процессы морфогенеза.

12


На настоящий момент

значительный интерес в данной области
представл
яют

работы, посвященные влиянию электромагнитного
экранирования различной продолжительности на регенерацию планарий. В
ходе одной из таких работ было исследовано влияние электромагнитного
экранирования на процессы регенерации планарий. Показано, что
кратковре
менное периодическое электромагнитное экранирование (один час в
сутки) приводит к увеличению скорости регенерации на 13%, а длительное
электромагнитное экранирование (23 часа в сутки) регенерирующих планарий в
течение десяти дней увеличивает скорость их ре
генерации на 147%. (Демцун,
2008).

Исследование по изучению процесса пролиферации планарий вида
Dugesia
tigrina
, на которых в ходе эксперимента воздействуют слабые комбинативные
магнитные поля (КМП) проведено А. М. Ермаковым (Ермаков, 2010). В данной
работ
е экспериментально доказана возможность модуляции регенерации
планарий
Dugesia tigrina

и развития жуков
Tenebrio molitor

с помощью слабых
комбинированных магнитных полей (КМП) в режиме магнитного
параметрического резонанса, а также КМП с крайне слабой ампл
итудой
переменной компоненты. Полученные результаты показывают возможность
создания принципиально нового поколения магнитотерапевтической
аппаратуры для лечения ряда широко распространенных социально
-
значимых
болезней, а также имеют важное значение, как дл
я планирования, так и для
оценки эпидемиологических исследований (Ермаков, 2010).

В недавнее время были проведены работы по изучению влияния
ртутьорганических соединений природного происхождения на регенерацию
планарий
Dugesia tigrina
. Результаты этих иссл
едований доказывают
способность накопления высоких концентраций ртути в организме планарий,
что, как выяснилось, не мешает их половому размножению. При нанесении
значительных травм восстановительные процессы у планарий
D. tigrina

подавляются, и наблюдается

гибель некоторых контрольных и большинства
13


опытных животных. Интенсивность заживления дополнительных надрезов
зависит от величины повреждаемого фрагмента тела планарий и от
локализации надреза (Медведев, Комов, 2005).

В настоящий момент работы по изучению

регенерации планарий перешли
на новый этап исследований, что связано с применением метода проточной
цитометрии. В исследовании Ермакова (Ermakov

al
., 2012) качественные и
количественные характеристики необластов были изучены с помощью данного
метода. К
оличественная оценка клеточного цикла, связанная с изменениями
системы стволовых клеток планарии, была проведена в различных
физиологических условиях (неповрежденные и регенерирующие животные) и
под влиянием физических (ионизирующего излучения) и химически
х
(мелатонина и колхицин) факторов. В результате анализа стволовых клеток,
метод проточной цитомерии оказался эффективным, а значит, может быть
рекомендован к дальнейшему применению.
















14



ВЫВОДЫ


1.)

Осуществлено культивирование
и разведение
бесполо
й
лабораторной культуры

планарий вида
S
chmidtea

mediterranea

и
D
ugesia

tigrina
.


2.)

Биосовместимые м
агнитные наночастицы
серебра
имеют разное
воздействие на регенерацию планарии
S
chmidtea

mediterranea
, при
концентрации 1
мл/
5
00

м
л они выступают в качестве акти
ваторов
пролиферации, доза в 3
мл/500

м
л ингибирует процесс регенерации бластемы.
Концентрация в
5
мл
/500

м
л

является летальной для данного вида
.

Бластема
планарий
S
chmidtea

mediterranea

на тканевом уровне

характеризуется
отсутствием

оформленных границ покро
вного ресничного эпителия и
хорошо
выраженной базальной мембраны
.


3.)

Для вида
D
ugesia

tigrina

выбранные концентрации магнитных
наночастиц
серебра
не оказывают значительного воздействи
я на пролиферацию
в сравнение с контрольной группой, а б
олее
высокие концен
трации магнитных
наночастиц вызывают летальный исход у планарий
.


4.)


В
ыделены
и описаны
морфологические особенности

необластов
D
ugesia

tigrina

на ра
зных стадиях клеточного цикла
.
необласт не участвующий
в формировании регенерационной почки
-

бластемы
; на ста
дии деления
клеточного ядра
; формирования клеток паренхимы, формирования
эпителиальной ткани
.
Большая часть необластов выделена из бластемы
планарий; на постбластемном участке необласты отмечаются значительно
реже.



15



СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ


1)

Демц
ун Н.А., Тимурьянц Н.А., Мартынюк В.С. Особенности
регенерации планарии
Dugesia tigrina

при их электромагнитном экранировании
в различны
е сезоны года

//

Физика живого, Т. 16,
No
2, 2008.
-

С. 85

-

91
.

2)

Дыганова Р.Я., Порфирьева Н.А. Планарии Азиатской части

СССР:
Морфология,

систематика, распространение.

//

Казань: Изд
-
во Казанского ун
-
та, 1990.


150 с.

3)

Ермаков М.А. Влияние слабых комбинированных магнитных полей
на регенерацию планарий
Girardia tigrina

и метаморфоз жуков
Tenebrio molitor
.

//
Авторская диссе
ртационная работа,

Пущино, 2010.

4)

Иванов А.В., Мамкаев Ю.В. Ресничные черви (
Turbellaria
), их
происхождение и эволюция (Филогенетические очерки).
//
Л., ©Наукаª, 1973.


С. 1


221.

5)

Иванов А.В., Полянский Ю.И., Стрелков А.А. Большой практикум о
зоологии бесп
озвоночных (Простейшие, губки, кишечнополостные,
гребневики, плоские чер
ви, немертины, круглые черви).
//

М.: Высшая школа,
1981.


504 с.

6)

Медведев И.В., Комов В.Т. Воздействие ртутьорганических
соединений природного происхождения на регенерацию у двух вид
ов
пресноводных планарий
Dugesia tigrina

и
Polycelis tenuis

// Онтогенез. 2005. Т.
36. № 1.
-

С. 35

40.

7)

Наумова Т.В. Морфология, систематика и филогения рода
Bdellocephala

De Man, 1875 (
Plathelminthes, Turbellaria, Tricladida: Paludicola
)

//
Владивосток, 2
003.


22 с.

8)

Першина
А.Г., Сазонов А.Э., Мильто И.В.

Использование
маг
нитных наночастиц в биомедицине

// Бюллетень сибирской медицины, № 2,
2008.


C
. 70


78.

16


9)

Поляков А.Ю., Гольдт А.Е., Соркина Т.А., Давыдова Г.А., Гудилин
Е.А., Перминова И.В.

Синтез биос
овместимых магнитных наночастиц с
различной морфологией и их стабилизация гуминовыми кислотами
//
Перспективные материалы, 2010.


С. 204


210.

10)

Порфирьева Н.А., Дыганова Р.Я. Планарии Европейской части
СССР. Мофрология, систематика, распространение.


Каз
ань: Издательство
Казанского университа, 1987.


189 с.

11)

Ромейс Б. Микроскопическая техника. М.: Иностранная литература.
1953.


718 с.

12)

Тирас Х. П., Сахарова Н.Ю. Прижизненная морфометрия
регенерации планарий // там же. 1984. Т. 15. №1. С. 41
-
48.

13)

Тирас Х.П,

Хачко В. И. Критерии и стадии регенерации у планарий
// Онтогенез.


1990.


Т 21.


С. 620

624.

14)

Чернышева А.О. Особенности строения кожно
-
мышечного мешка
триклад (
Turbellaria, Tricladida
) // Vestnik zoologii, 36 (2), 2002.


С. 47


56.

15)

Шейман И.М., Седе
льников З.В., Крещенко Н.Д. и др. Морфогенез
у планарий
Dugesia tigrina

// Там же. 2004. Т. 35. № 4. С. 285

291.

16)

Шейман И. М., Крещенко Н. Д., Нетреба М. В. и др. Процесс
регенерации у планарий разных видов // Онтогенез.
-

2010.
-

Т. 41, N 2.
-

С.114
-
119.

17)

Alejandro Sa´nchez Alvarado, Hara Kang. Multicellularity, stem cells,
and the neoblasts of the planarian
Schmidtea mediterranea
.

Experimental Cell
Research, 2005, 306: 299


308
р
.

18)

Amiard, J.
-
C.; Amiard
-
M
on and their
use as biomarkers
.
Aquat. Toxicol. 2006, 76, 160

202 p.

19)

Artem M. Ermakov, Olga N. Ermakova, Andrei A. Kudravtsev, Natalia
D. Kreshchenko. Study of planarian stem cell pr
oliferati
on by means of flow
.

Mol Biol Rep, 2012, 39:3073

3080p.

17


20)

Auladell, C., Garicia
-
Valero, J., Bagunà, J. Ultrastructural localization of
RNA in the chromatoid bodies of undifferentiated cells (neoblasts) in planarians by
the
RNase
-
gold compl
ex technique.

J. Morphol. 216: 1993. 319

326
р
.

21)

Baguna J. Planarian neoblasts
.

Nature. 1981. 290(5):14

15p
.

22)


Baguna J. The planarian neoblast: the rambling history of its origin

and
some current black boxes
.

Int. J. Dev. Biol.
, 2012,

56: 19
-
37
р.

23)

Baguna J.
, Romero R., Quantitative analysis of cell types during growth,
degrowth and regeneration in the planarians
Dugesia mediterranea

and
Dugesia
tigrina
.

Hydrobiologia, 1981, 84: 181

194p.

24)

Baguna J., Salo E. Regeneration and pattern formation in planarians I.
The pattern of mitosis in anterior and posterior regeneration in
Dugesia (G) tigrina,
and a new pr
oposal for blastema formation
.

J. Embryol. exp. Morph., 1984,83, 63
-
80
р
.

25)

Baguna J., Salo E., Auladell C.
Regeneration and pattern formation in
planarians III
. Evidence that neoblasts are totipotent stem cells and

the source of
blastema cells
.

Development, 1989, 107: 77
-
86p.

26)

Bosch Thomas C. G.
Stem Cells: From Hydra to Man
.

Springer, 2008.
-

P. 204.

27)

Brunner, T. J.; Wick, P.; Manser, P.; Spohn, P.; Grass, R. N.;

Limbach,
L. K.; Bruinink, A.; Stark, W. J. In vitro cytotoxicity of oxide nanoparticles:
comparison to asbestos, silica and the

effect of particle solubility
.

Environ. Sci.
Technol. 2006, 40, 4374


4381p.

28)

Chithrani, B. D.; Chan, C. W. Elucidating the mec
hanism of cellular
uptake and removal of protein
-
coated gold nanoparticle
s of different sizes and
shapes
.



1550
p
.

29)

Dubois, F. Contribution a l‱etude de la regenerati
on chez planaires
dulcicoles.

Bull.
Biol. 83: 1949. 213

218 р.

18


30)

Gup
ta AK, Curtis AS. Surface modified superparamagnetic
nanoparticles for drug delivery: interaction studies wit
h human fibroblasts in culture
.

J Mater Sci Mater Med 2004; 15 (4):493

6

p
.

31)

Hamilton, R. F., Jr.; Wu, N.; Porter, D.; Buford, M.; Wolfarth, M.;
Hol
ian, A. Particle length
-
dependent titanium dioxide nanomat
erials toxicity and
bioactivity
.

Part. Fibre Toxicol. 2009, 6, 35

p
.

32)

Harush
-
Frenkel, O.; Debotton, N.; Benita, S.; Altschuler, Y. Targeting of
nanoparticles to the clat
hrin
-
mediated endocytic pathwa
y
.

Biochem. Biophys. Res.
Commun. 2007, 353, 26

32

p
.

33)

Higuchi, S., Hayashi, T., Hori, I., Shibata, N., Sakamoto, H., Agata, K.
Characterization and categorization of fluorescence activated cell sorted planarian
stem cells

by ultrastructural analysis.

Dev.
Growth Differ. 49: 2007. 571

81 р.

34)

Hori, I. An ultrastructural study of the chromatoid body in
planarian
regenerative cells.

J. Electron Microsc.
31: 1982.63

72 р.

35)

Hori, I. Cytological approach to morphogenesis in the planarian
blastema. II. The effect of
neurop
eptides.

J. Submicrosc. Cytol. Pathol. 29: 1997. 91

97
р
.

36)

Javier García
-
Alonso, Farhan R. Khan, Superb K. Misra, Mark
Turmaine, Brian D. Smith, Philip S. Rainbow, Samuel N. Luoma, Eugenia Valsami
-
Jones. Cellular Internalization of Silver Nanoparticl
es in Gut Epithelia of the
Estuarine Polychaete
Nerei sdiversicolor
.

Environmental Science & Technology.


2011.


7 p.

37)

Lenicque P, Tchapajeva L. Action of substances modifying adrenergic
transmission on regeneration and scissiparity of the planarian
Duges
ia tigrina
.

Therapie. 1969; 24(6) :1043
-
58 p.

38)

erials for Tissue Engineering
.

Adv. Drug
Deliv. Rev. 2008. V. 60. P. 184

198 p.

39)

Moore, M. Do nanoparticles present ecotoxicological risks for the hea
lth
of the aquatic environment?

Enviro
n. Int. 2006, 32, 967

976 p.

19


40)


Morgan T. N. Regeneration
.
L.: MacMillan.
Co., 1901. 293 p.

41)

National Institutes of Health. Stem Cells: Scientific Progress and Future
Directions.
2001. Retrieved 08

05

2004
from
http://stemcells.nih.gov/info/basics/

42)

Navarro, E.; Piccapietra, F.; Wagner, B.; Marconi, F.; Kaegi, R.; Odzak,
N.; Sigg, L.; Behra, R. Toxicity of Silver Nanoparticles to
C
hlamydomonas
reinhardtii
.

Environ. Sci. Technol. 2008, 42, 8959

964 p.

43)

NeenuSi
ngha, Gareth J.S. Jenkinsa, RomisaAsadib, Shareen H. Doaka.
n oxide nanoparticles (SPION)
.
Coaction
publishing.


2010.


15 p.

44)

Nentvig M.E. Comparative morphological studies of head development
after decapitation

and after fission in the planarian
Dugesia dorothocephala
.

Trans.
Am. Microsc. Soc. 1978,50
,


553

561
р.

45)

Otto FJ, Schumann J, Zante J (1990) High
-
resolution DNA flow

in malignant melanoma
.

Cytom suppl 4: 55p.

46)

Randolph, H. Observations and experim
ent
s on regeneration in
planarians
.

Arch. Entw. Mech. Org. 5: 1897. 352

372

р
.

47)

Pankhurst QA, Connolly J, Jones SK, Dobson J. Applications of
magnetic nanoparticles in biomedic
ine
.

J Phys D Appl Phys 2003; 36(13):R167

81p.

48)

Pederson
K.J. Cytological studi
es
on the planarian neoblast.

Z.
Zellforsch.
50: 1959. 799

817
р
.

49)

Fakhrullin. Interfacing Multicellular Organisms with Polyelectrolyte Shellsand
Nanoparticles: A
Caenorhabtidis elegans

Stud
y
.

Langmuir.


2011.


6 p.

50)

Ringwood, A. H.; McCarthy, M.; Bates, T. C.; Carroll, D. L. The effects
of silver
nanoparticles on oyster embryos

//

Mar. Environ. Res. 2010, 69, S 49


51

p
.

51)

Sato, K., Shibata, N., Orii, H., Amikura, R., Sakurai, T., Agata, K.,

Kobayashi, S., Watanabe, K. Identification and origin of the germline stem cells as
revealed by the expression of nano
s
-
related gene in planarians.

Dev.
Growth Differ.
48: 2006. 615

628 р.

20


52)

Sengel C. La region caudale d‱une planaire est
-
elle capable d‱indu
r
e la
regeneration d‱un pharunx
.

J. Embriol. Exp. Morphol. 1959. V. 7. №. 1. P. 73
-
85p.

53)

Teshirogi, W., Ishida, S. (Eds.) Biology of Planarians

Foundation,
Application

& Experiment
.

Kyoritsu syuppan, Tokyo, 1987.

54)

Thomas R. Pisanic, Jennifer D. Blackwell, Ve
ronica I. Shubayev, Rita R.
Finones, Sungho Jin. Nanotoxicity of iron oxide nanoparticle inte
rnalizationin
growing neurons
.

Biomaterials.


2007.


10 p.

55)

Wang, W.
-
X.; Stupanoff, I.; Fisher, N. S. Bioavailability of dissolved
and sediment
-
ma
rine deposit
-
.

Mar. Ecol.: Prog.
Ser. 1999, 178, 281

293

p
.

56)

Dugesia
tigrina
.

Diss.
Harvard Univ. Cambridge, Massachusetts. 1961.

57)

Wilhelm C, Billotey C, Roger J, Pons JN, Bacri J
C, Gazeau F.
nction of their
surface coating
.

Biomaterials 2003; 24(6) : 1001

11 p.

58)

Wilhelm C, Gazeau F, Roger J, Pons JN, Bacri JC. Interaction of anionic
es with cells: kinetic analyses of membrane adsorption

and subsequent internalization
.
Langmuir 2002;18 (21):8148

55

p
.

59)

Wolff, E., Dubois, F. Sur la migration des cellules de régé
nération chez
les planaires.
Rev. Suisse.
Zool. 55: 1948. 218

227.

60)

Wolff E. R
ecent researches on
the regeneration of planaria
.
Regeneration. N.Y.: Ronald Press, 1962. P. 53
-
84 p.

61)

Zhang Y, Kohler N, Zhang M. Surface modification of
and their intracellular uptake
.
Biomaterials 2002; 23(7):155
3

61
p
.

62)

Ziller C. La regeneration du pharynx ches la planaire
Dugesia tigrina
.
C.
R. Acad. Sci.
Paris. D. 1973. V. 277. P. 1363
-
1368

p
.



Приложенные файлы

  • pdf 7773930
    Размер файла: 630 kB Загрузок: 0

Добавить комментарий