астрагала серпоплодного – «Фларонин» – гипоазотемическое средство. В надземной части A. uliginosus обнаружены кумарины, в листьях – азотсодержащие соединения и флавоноиды [1]

Флавоноиды Astragalus uliginosus L. и A. schelichovii Turcz. секции Euodmus Bunge (Fabaceae).

Коцупий О. В.

Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Центральный сибирский ботанический сад СО РАН, Новосибирск, [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]

Секция Euodmus Bunge подрода Cercidothrix Bunge рода Astragalus L. (Fabaceae) на территории России включает 3 вида – южно-европейский Astragalus falcatus L. (астрагал серпоплодный), северо-азиатский A. uliginosus L. (астрагал болотный) и северо-восточно-азиатский A. schelichovii Turcz. (астрагал Шелихова). Виды имеют достаточно четкие анатомо-морфологические признаки. Биохимическое исследование видов секции представляет интерес как с точки зрения хемосистематики, так и с позиций ресурсоведения.

Достаточно хорошо изучен химический состав официнального А. falcatus. В надземной части растений этого вида обнаружены тритерпеноиды и азотсодержащие соединения, в листьях – кумарины [1], в растении - каротиноиды [2]. Флавоноиды найдены во всех частях растения. Главный компонент – робинин, в надземной части его количество (в %) составило 2,20, в стеблях – 0,16 - 1,12, в листьях 1 – 2,33, в бутонах – 1,10, в цветках – 1, 47 - 1,48, в плодах 0,47. Кроме робинина, в листьях А. falcatus идентифицированы кемпферол–3–О-
·-рутинозид [1], кверцетин-3-О-[
·-D-глюкопиранозил (1 3) -
·-L–рамнопиранозил (1 6)] -
·-D-галактопиранозида 7-O-
·-D-глюкопиранозид; изорамнетин 3-O-[
·-D-ксилопиранозил (1 3) -
·-L-рамнопиранозил (1 6)] -
·-D-галактопиранозида 7-O-
·--L–рамнопиранозид [3]. Аптечный препарат, полученный из листьев и цветков астрагала серпоплодного – «Фларонин» – гипоазотемическое средство.

В надземной части A. uliginosus обнаружены кумарины, в листьях – азотсодержащие соединения и флавоноиды [1]. Нами не найдено литературных данных по исследованию химического состава растений A. schelichovii.

Цель нашего исследования - изучить состав и содержание флавоноидов у растений сибирских видов A. uliginosus и A. schelichovii секции Euodmus Bunge с хемотаксономических позиций, а также оценить ресурсную значимость объектов исследования.
Для извлечения суммы флавоноидов проводили исчерпывающую экстракцию 70 % этанолом при нагревании на водяной бане. Для проведения кислотного гидролиза к 0,5 мл водно-этанольного извлечения прибавляли 0,5 мл HCl (2 н) и нагревали на кипящей водяной бане в течение 2-х часов.

ВЭЖХ проводили на жидкостном храмотографе «Agilent 1200» с диодноматричным детектором и системой для сбора и обработки хроматографических данных ChemStation. Разделение проводили на колонке Zorbax SB-C18, размером 4,6Ч150 мм, с диаметром частиц 5 мкм, применив градиентный режим элюирования. В подвижной фазе содержание метанола в водном растворе ортофосфорной кислоты (0,1 %) изменялось от 50 до 52 % за 56 мин. Скорость потока элюента 1 мл/мин. Температура колонки 26 оС. Объем вводимой пробы 5 мкл. Детектирование осуществляли при
· = 255, 270, 290, 340, 350, 360, 370 нм. Для приготовления подвижных фаз использовали метиловый спирт (ос.ч.), ортофосфорную кислоту (ос.ч.), бидистиллированную воду. Стандартные растворы готовили в концентрации 10 мкг/мл в этиловом спирте. Анализируемые соединения идентифицировали сравнением со стандартными образцами. Анализ каждого образца проводили в 2-кратной повторности.

Содержание индивидуальных компонентов (Сх) в процентах в пересчете на абсолютно-сухое сырье вычисляли по формуле:



где Сст - концентрация соответствующего стандартного раствора флавонола, мкг/мл; S1 – площадь пика флавонола в анализируемой пробе, е.о.п.; S2 – площадь пика стандартного флавонола, е.о.п.; V1 – объем элюата после вымывания флавонолов с концентрирующего патрона, мл; V2 – общий объем экстракта, мл; М – масса навески, мг; В – влажность сырья, %

В гидролизатах листьев растений A. uliginosus и A. schelichovii, исследованных с помощью ВЭЖХ, обнаружены пять веществ, которые по максимумам УФ-спектров отнесены к веществам агликоновой природы; из них идентифицированы кверцетин, кемпферол и изорамнетин (таблица 1).

Таблица 1
Время удерживания и спектральная характеристика агликонов флавоноидов Astragalus uliginosus и A. schelichovii в обращенно-фазовой ВЭЖХ
№ пика
Вещество
Время удерживания, мин
Спектральные данные,
·

1
агликон I
5,4
256, 372 нм

2
кверцетин
6,7
255, 370 нм

3
агликон II
9
249 пл., 266, 322 пл., 367 нм

4
кемпферол
11,2
265, 322 пл., 366 нм

5
изорамнетин
12,5
254, 370 нм


В таблице 2 приведено содержание индивидуальных компонентов и суммы агликонов растений изучаемых видов из разных ценопопуляций, а также образцы разных лет одной ценопопуляции. Как видно из таблицы, у двух изученных видов нет отличий в качественном составе и суммарном содержании агликонов флавоноидов. Некоторые отличия обнаружены в соотношении индивидуальных компонентов. Так, в растениях изучаемых видов накапливается кемпферола больше, чем кверцетина: у A. uliginosus - от 1,1 до 9,6 раз, у A. schelichovii от 2,5 до 20 раз. У A. uliginosus кверцетина больше, чем агликона II, у A. schelichovii кверцетина меньше или равно агликону II.
Таблица 2
Содержание агликонов флавонолов в листьях видов Astragalus uliginosus и A. schelichovii в обращенно-фазовой ВЭЖХ (в % от массы абсолютно–сухого сырья)
Место произрастания, дата сбора,
фаза развития
Агли
кон I
Квер–
цетин
Агли
кон II
Кемп–
ферол
Изо-рам-нетин
Сумма агликонов

A. uliginosus

Забайкальский край, Улетовский р-н, 137 км от Читы на запад, луг. 25.07.2001. Ц
0,05
0,33
0,21
0,6
0,07
1,27

Забайкальский край, Газ-Заводской р-н, окр. с. Урюпино, застава, луг. 24.07.2002. Ц
0,003
0,32
0,04
0,77
0,19
1,32

Забайкальский край, окр. п. Газ-Завод, приречные заросли. 20.07.2002. Ц
0,01
0,22
0,04
0,33
0,06
0,66

Забайкальский край, Карымский р-н, окр. с. Урульга, влажный осоковый луг. 13.07.2002. Ц
0,06
0,29
0,23
0,68
0,05
1,30

Забайкальский край, окр. с. Урульга, влажный осоковый луг.13.07.2003. Ц
0,03
0,28
0,05
0,70
0,05
1,11

Забайкальский край, окр. с. Урульга, берег р. Урульга. 13.07.2003. Ц
0,03
0,15
0,14
0,68
0,07
1,08

Респ. Бурятия, Баунтовский р-н, окр. п. Таксимо, суходольный луг.15.07.1975. Ц
0,05
0,24
0,11
0,40
0,03
0,84

Кемеровская обл., Промышленновский р-н, окр. п. Ваганово, осоково-злаковое болото. 13.07.1989. Ц
0,03
0,04
0,22
0,34
0,04
0,66

НСО, Каргатский р-н, окр. с. Филино, разнотравный луг. 14.07.2005. Ц
0,03
0,25
0,15
0,78
0,04
1,24

A. schelichovii

Якутия, Жиганский р-н, лев. берег р. Собопол, песчано-галечниковая пойма. 30.07.1958. Ц-П
0,03
0,05
0,07
0,47

0,62

Якутия, Булунский р-н, окр. п. Джарджан, галечниковый берег. 4.08.1970. Ц-П
0,02
0,02
0,42
0,32

0,78

Якутия, Жиганский р-н, устье р. Катары, песчано-галечниковый берег. 30.07.1970. Ц-П
0,06
0,03
0,29
0,30
0,02
0,69

Якутия, Усть-Янский р-н, окр. п. Усть-Куйга, каменистый берег ручья. 03.08.1988. Ц-П
0,04
0,14
0,14
0,33
0,01
0,66

Хабаровский край, окр. п. Софийск, р. Олга, песчано-галечниковый берег. 10.07.1977. Ц
0,05
0,03
0,47
0,30
0,02
0,86

Хабаровский край, окр. п. Софийск, долина р. Олга, разнотравный луг. 11.06.1978. Ц
0,09
0,14
0,34
0,45
0,03
1,05

Примечание: Ц – фаза цветения, П – фаза плодоношения.

Достаточно четкие отличия в компонентном составе изучаемых видов обнаружены на хроматограммах этанольных экстрактов листьев. Качественный состав растений А. uliginosus насчитывает от 21 до 38 фенольных кислот, гликозидов и агликонов флавоноидов, растений A. schelichovii – от 9 до 13 компонентов. При изучении растений разных ценопопуляций выделены типичные для изучаемых видов «флавоноидные профили». Главные компоненты этих профилей, по максимумам спектров поглощения соответствующие гликозидам флавоноидов, различны у растений А. uliginosus и A. schelichovii (рисунок).

Таким образом, в гидролизованных экстрактах листьев растений А. uliginosus и A. schelichovii, исследованных с помощью ВЭЖХ, обнаружено достаточно большое содержание агликонов флавоноидов, которое составляет 0,6 – 1,3 % от массы абсолютно–сухого сырья. Из пяти веществ, по максимумам УФ-спектров отнесенных к агликонам флавоноидов; идентифицированы кверцетин, кемпферол и изорамнетин. Богатый состав фенольных кислот, гликозидов и агликонов флавоноидов в экстрактах листьев А. uliginosus отличается от более скудного состава фенольных соединений A. schelichovii.


Рисунок. Типичные «флавоноидные профили» А. uliginosus (Забайкальский край, Газ-Заводской р-н, окр. с. Урюпино, 24.07.2002) и A. schelichovii (Хабаровский край, окр. п. Софийск, р. Олга, 10.07.1977), полученные методом ВЭЖХ. По оси абсцисс – время удерживания, мин., по оси ординат – оптическая плотность.

Литература
1. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование: cемейства Hydrangeaceae – Haloragaceae. Л., 1987. Т. 3. 326 с.
2. Гигошвили Т.И., Алания М.Д. Каротиноиды Astragalus falcatus // Химия природных соединений. 2003. Т. 39. № 4. С. 403.
3. Alaniya M.D., Kavtaradze N.Sh., Skhirtladze AV., Sutiashvili M.G. Flavonoid oligosides from Georgian Astragalus falcatus // Chemistry of Natural Compounds. 2011. Vol. 47. N. 3. Р. 377-381.

Сх =

Сст · S1 · V1 · V2 · 100

,

S2 · M · (100–В)

5

4

3

2

1

0

0 10 20 30 40 50

1 A. schelichovii
2 А. uliginosus


2

1



Заголовок 2 Заголовок 5 Заголовок 6 Заголовок 7 Заголовок 815

Приложенные файлы

  • doc 11159537
    Размер файла: 97 kB Загрузок: 0

Добавить комментарий