antioxidants – emoxipinum (3-oxy-6-metyl-2-etyl-piridin hydrochloridum) and alpha-tocopheryl acetate, to control the ампулах по 1 мл 1 % раствора, ?-токоферола. ацетат – 10 % масляный раствор в ампулах (АО.


Чтобы посмотреть этот PDF файл с форматированием и разметкой, скачайте файл и откройте на своем компьютере.
СИбИРСКИй ОНКОЛОГИЧЕСКИй жУРНАЛ. 2011. №1 (43) ИЯ пРОтИвООпУхОЛЕвО хИМИОтЕРАпИИ АНтИОКСИ МИ пРЕпАРАтАМИ ... эффективность и токсичность некоторых про тивоопухолевых препаратов в условиях роста холангиоцеллюлярного рака РС-1. Материал и методы На 228 белых нелинейных крысах мужского пола с перевиваемой опухолью – холангиоцел люлярным раком крыс РС-1 (НИИ эксперимен тальной диагностики и терапии опухолей РОНЦ им. Н.Н. блохина РАМН) проведено изучение возможности применения синтетических пре паратов антиоксидантного действия на фоне противоопухолевой химиотерапии. Для прове дения эксперимента использованы следующие фармакологические препараты: эмоксипин (фГУп «Московский эндокринный завод») в ампулах по 1 мл 1 % раствора, α-токоферола ацетат – 10 % масляный раствор в ампулах (АО «Ай СИ эН ОКтЯбРь», г. Санкт-петербург). в качестве препарата сравнения при исследовании корригирующего влияния антиоксидантов на процессы пОЛ в организме опухоленосителя нами применялся α-токоферола ацетат, так как он обладает доказанным наибольшим антиокси дантным действием из всех веществ природного происхождения [1]. Для моделирования курса противоопухоле вой химиотерапии использованы препараты, наиболее широко применяемые в клинической практике, с разным механизмом противоопухо левого действия: циклофосфан – противоопу холевый препарат из группы алкилирующих цитостатиков (ОАО «биохимик», г. Саранск) во флаконах по 200 мг сухого вещества (растворял ся в стерильном 0,9 % растворе натрия хлорида), в дозе 20 мг/кг, внутримышечно (в/м), через день № 5; 5-фторурацил – цитостатик из груп пы антиметаболитов нуклеинового обмена, по 10 мг/кг внутримышечно через день № 5; рубо мицин – противоопухолевый антрациклиновый антибиотик (ЗАО «брынцалов-А», г. Москва) во флаконах по 20 мг сухого вещества (рас творялся в стерильном 0,9 % растворе натрия хлорида) в дозе 4 мг/кг, внутрибрюшинно через эмоксипин вводился внутримышечно в дозах 3,4, 6,8, 17, 25 мг/кг – условно соответствующих 1 % от LD , 2, 5 и 8 % от LD ; α-токоферола ацетат применялся в/м в дозах 9,5, 19, 47,5 мг/кг, изомолярно соответствующих изучаемым дозам эмоксипина (3,4; 6,8 и 17 мг/кг). У трех групп моделировалась противоопухолевая химиотера пия циклофосфаном, 5-фторурацилом и рубо мицином, а также изучались комбинации этих цитостатиков с α-токоферола ацетатом в дозе 47,5 мг/кг и эмоксипином 17 и 25 мг/кг. Корри гирующие препараты вводились с 21 по 35-е сут роста опухоли ежедневно; интактную группу составили 12 животных, животным контрольной группы вводился физиологический раствор в/м. животных всех опытных серий забивали путем декапитации под эфирным наркозом на 35-е сут после перевивки опухолевого штамма. в плазме крови, эритроцитах, гомогенатах печени, почек, ткани сердца и кишечника, а также ткани опухоли определяли содержа ние вторичного продукта перекисного окис ления липидов – малонового диальдегида (МДА) и железом индуцированного МДА (Fe-МДА) (Конюхова С.Г., 1989), рассчиты вали антиокислительную активность (АОА) (Клебанов Г.И., 1999), определяли активность ферментов антиокислительной защиты – ката лазы (Королюк М.А., 1988) и супероксиддисму тазы (СОД) по методу С. Чевари (1981) [3–6]. Для оценки изменений в метаболическом звене гомеостаза определяли уровень креатинина, мочевины, активность Алт и Аст, содержание глюкозы, молекул средней массы (МСМ), общую (ОКА) и эффективную (эКА) концентрации альбумина. по полученным значениям эКА, ОКА и МСМ рассчитывали: резерв связанного альбумина (РСА), индекс токсичности (Ит) и критерии интоксикации (КИ) [2]. производили общий анализ крови, рассчитывали индекс лей коцитарной интоксикации (ИЛИ). Оценивали массу животных-опухоленосителей, массу и индекс массы опухоли (ИМО), рассчитанный как отношение массы опухоли к массе животного. противоопухолевый эффект оценивали по индек су торможения роста опухоли (ИтРО): ИтРО 100 – (средняя m контр /m ×100), где средняя m контр – средняя масса опухоли в контрольной группе, – масса опухоли в опытной группе. Статистическую обработку проводили с использованием критерия Стьюдента (t). Из менения считали статистически значимыми СИбИРСКИй ОНКОЛОГИЧЕСКИй жУРНАЛ. 2011. №1 (43) КОпИН Результаты и обсуждение Рост холангиоцеллюлярного рака РС-1 в организме животных сопровождался резким усилением процессов пОЛ на фоне выражен ного истощения антиоксидантной защиты организма-опухоленосителя по сравнению с интактными животными. это проявлялось по вышением содержания вторичных продуктов пОЛ – МДА и Fe-МДА в плазме крови, тканях печени и почек, угнетением активности ката лазы и СОД в плазме крови и ткани печени. На фоне роста опухоли отмечено снижение эКА на 75 % (р<0,001), снижение РСА – на 64 % (р<0,001) и увеличение индекса токсичности в 5 раз (р<0,001). Увеличение СОэ произошло в 4,6 раза (р<0,001) по сравнению с уровнем интакт ных животных. в плазме крови происходило значительное увеличение содержания молекул средней массы, мочевины и креатинина, разви вались гипогликемия, анемия и лейкопения. полученные результаты полностью согла суются с литературными данными, по которым на фоне роста опухоли в организме происходит смещение прооксидантно-оксидантного равно весия, развивается дефицит антиоксидантных ферментов первой линии защиты – СОД, глутатионпероксидазы и каталазы [11, 15]. по добное состояние объясняют развивающимся гипогликемическим давлением опухоли на метаболизм нормальных тканей, что, в свою очередь, приводит к мобилизации тканями в ка честве энергетических ресурсов жирных кислот. Данное обстоятельство плюс развивающаяся на фоне роста опухоли тканевая гипоксия приво дят к выраженному усилению процессов пОЛ в организме. при противоопухолевом лечении дефицит антиоксидантных ферментов усугубляется, в ряде случаев отмечается истощение механиз мов антиоксидантной защиты, что приводит к снижению резистентности организма и к по вреждению жизненно важных органов и систем. в нашем эксперименте применение химиопре паратов вызывало торможение роста опухоли, так, при введении циклофосфана ИтРО со ставил 40,2 %, при использовании рубомицина ИтРО – 33,5 ± 7,05 %. в условиях применения 5-фторурацила ИМО уменьшился на 45 % (р<0,05). в связи с уменьшением опухолевой массы под влиянием цитостатиков в организме опухоленосителей несколько ограничивались показатели эндотоксикоза – наблюдалось сни жение содержания МДА во внутренних органах, повышение РСА, снижался уровень гипогли кемии, однако происходило усиление лейко пении, сохранялось угнетение АОА в крови и внутренних органах. Отрицательные эффекты специфического противоопухолевого лечения диктуют необходимость поиска и разработки новых подходов для получения оптимального лечебного эффекта при уменьшении токсиче ских эффектов цитостатической терапии. при комбинированном применении проти воопухолевых химиопрепаратов и α-токоферола ацетата не происходило изменений весовых показателей опухоли по сравнению с таковыми у животных, получавших только цитостатик, и сохранялись изменения процессов пОЛ, вызванные введением противоопухолевых препаратов. Кроме того, в крови животных и в тканях внутренних органов происходило усиле ние активности каталазы, повышение АОА по сравнению с уровнем этих показателей у живот ных, получавших монотерапию цитостатиками. в ткани опухоли применение циклофосфана с α-токоферола ацетатом проявилось ростом уровня МДА на 36 % (р<0,05) по сравнению с этим показателем у животных, получавших монотерапию циклофосфаном. Кроме того, происходило снижение содержания в плазме крови МСМ, увеличение количества лейкоци тов и содержания гемоглобина по сравнению с показателями у животных, получавших моно терапию цитостатиками. таким образом, комби нация α-токоферола ацетата в максимальной из изученных доз – 47,5 мг/кг, не уменьшая проти воопухолевую эффективность цитостатиков, не сколько ограничивала показатели эндотоксикоза в организме исследуемых животных. при комбинированном использовании противоопухолевых препаратов и эмоксипина отмечено усиление противоопухолевого эффекта цитостатиков. это наблюдалось при введении эмоксипина в дозах 17 и 25 мг/кг (табл. 1). так, у животных, получавших комбинацию циклофос фана и эмоксипина в дозе 17 мг/кг, масса опухоли уменьшилась на 44 % (р<0,01) по сравнению с животными, получавшими только циклофосфан. СИбИРСКИй ОНКОЛОГИЧЕСКИй жУРНАЛ. 2011. №1 (43) ИЯ пРОтИвООпУхОЛЕвО хИМИОтЕРАпИИ АНтИОКСИ МИ пРЕпАРАтАМИ ... Индекс массы опухоли в этой группе был на 73 % (р<0,001) ниже контрольного уровня, а ин декс торможения роста опухоли составил 66,3 %. введение эмоксипина в дозе 17 мг/кг на фоне применения рубомицина способствовало сни жению массы опухоли на 39 % и на 55 % – при использовании эмоксипина в дозе 34 мг/кг, при этом индекс массы опухоли уменьшился на 50 % и 63 % соответственно в сравнении с группой животных, получавшей рубомицин. применение эмоксипина на фоне модели рования химиотерапии холангиоцеллюлярного рака оказывало выраженное дезинтоксикаци онное действие на организм опухоленосителей: наблюдалось увеличение ОКА и эКА, снижение концентрации МСМ в плазме крови, уменьше ние критериев интоксикации, нормализация активности Алт и Аст, снижение содержания креатинина, а также увеличение содержания лейкоцитов и концентрации гемоглобина по отношению к уровню показателей у животных, получавших цитостатик в режиме монотерапии (рис. 1). Комбинация циклофосфана с эмоксипи ном в дозах – 3,4 и 6,8 мг/кг вызывала умеренное ограничение процессов пОЛ в организме опу холеносителя, с увеличением дозы эмоксипина до 17 мг/кг выраженность эффектов нарастала, и при использовании максимальной из изучен ных доз (25 мг/кг), наблюдался наибольший корригирующий эффект. Рис. 1. влияние комбинированного при менения рубомицина с эмоксипином и α-токоферолом на некоторые показатели эндогенной интоксикации (в % к данным интактной группы животных, v – до стоверность различия р<0,05 с данными интактной группы, # – достоверность различия р<0,05 с данными контрольной группы, * – достоверность различия р<0,05 с данными группы, получавшей рубомицин) Рис. 2. влияние эмоксипина и α-токоферола ацетата на антиокислитель ную активность (в %) в органах экспери ментальных животных и ткани холан гиоцеллюлярного рака РС-1 в условиях моделирования химиотерапии циклофос фаном в дозе 20 мг/кг. * – достоверность отличия с данными интактной группы, р<0,05; ** – достоверность отличия с данными контрольной группы, р<0,05 СИбИРСКИй ОНКОЛОГИЧЕСКИй жУРНАЛ. 2011. №1 (43) КОпИН таблица 1 лияние α-токоферола ацетата и эмоксипина в комбинации с циклофосфаном на весовые характеристики холангиоцеллюлярного рака Группы животных Масса крысы с опухолью, г Масса крысы без опухоли, г Масса опухоли, г Индекс массы опухоли ИтРО Контроль Циклофосфан 20 Циклофосфан + эмоксипин 17 мг/кг 114,8 ± 6,79 8,47 ± 2,11 % Циклофосфан + эмоксипин 25 мг/кг Циклофосфан + α-токоферола ацетат 172 ± 11,94 примечание: р – уровень значимости различий с данными контрольной группы; р’– уровень значимости различий с данными группы «Циклофосфан». таблица 2 лияние применения эмоксипина и α-токоферола ацетата на показатели перекисного окисления липидов в ткани холангиоцеллюлярного рака С-1 при моделировании химиотерапии циклофосфаном в дозе 20 мг/кг ( Группы животных Каталаза, мКат/ Fe-MДA, ммоль/л MДA, ммоль/л AOA, ммоль/л СОД, усл. ед. Контроль Циклофосфан Циклофосфан + эмок р<0,001; р*<0,001 Циклофосфан + эмок р<0,001; р*<0,001 р<0,001; р*<0,001 р<0,001; р*<0,001 Циклофосфан + α-токоферол 47,5 мг/кг примечание: р – уровень значимости различий с данными контрольной группы; р* – уровень значимости различий с данными группы «циклофосфан». так, при использовании эмоксипина в дозе 25 мг/кг на фоне применения циклофосфана в плазме крови содержание МДА уменьшилось на 44 % (р<0,001), АОА увеличилась на 166 % (р<0,001), активность каталазы выросла на 45 % (р<0,001) (рис. 2). в ткани печени на 41 % (р<0,001) уменьшилась концентрация МДА, АОА увеличилась на 111 % (р<0,001). Актив ность СОД снизилась на 26 % (р<0,05), а актив ность каталазы выросла на 45 % (р<0,05) по сравнению с уровнем показателей у животных, получавших монотерапию циклофосфаном. Сходные изменения наблюдались и в других внутренних органах, при комбинированном при менении 5-фторурацила и эмоксипина 17 мг/кг МДА в почках снижался на 43 % (р<0,001) по сравнению с данными у животных, получавших только 5-фторурацил, а АОА возросла на 31 % в ткани опухоли комбинация противоопу холевых препаратов и эмоксипина, напротив, приводила к активации процессов пОЛ. До полнительное применение эмоксипина в дозе 25 мг/кг на фоне терапии 5-фторурацилом вы звало бóльшую активацию процессов пОЛ в опухолевой ткани, чем 5-фторурацил в виде мо нотерапии, что проявилось повышением концен трации МДА в ткани опухоли на 35 % (р<0,01). при комбинированном применении эмоксипина в дозе 25 мг/кг и циклофосфана активность СОД СИбИРСКИй ОНКОЛОГИЧЕСКИй жУРНАЛ. 2011. №1 (43) ИЯ пРОтИвООпУхОЛЕвО хИМИОтЕРАпИИ АНтИОКСИ МИ пРЕпАРАтАМИ ... в ткани опухоли уменьшилась на 44 % (р<0,001), а содержание МДА выросло на 92 % (р<0,001) (табл. 2). Аналогичный эффект наблюдался при применении рубомицина с эмоксипином. так, комбинированное применение рубомицина и эмоксипина в дозе 17 мг/кг в опухолевой ткани вызывало угнетение активности каталазы и СОД на 56 % (р<0,005) и 76 % (р<0,05) соответствен но (р<0,05). повышение дозы эмоксипина до 25 мг/кг приводило к еще большему угнетению активности ферментов антиоксидантной за щиты, при этом содержание МДА увеличилось на 79 % (р<0,05), а АОА снизилась на 33 % (р<0,01) в сравнении с группой, получавшей только рубомицин. таким образом, применение эмоксипина (17 мг/кг, 25 мг/кг) на фоне моделирования химиотерапии холангиоцеллюлярного рака РС-1, во-первых, повысило противоопухолевую эффективность циклофосфана, 5-фторурацила и рубомицина. во-вторых, эмоксипин в большей степени, чем токоферола ацетат в изомолярных дозах, снижал выраженность нежелательных побочных эффектов противоопухолевых пре паратов в условиях роста РС-1, что проявлялось корригирующим воздействием на процессы пОЛ в тканях печени и почек опухоленосите лей, ограничением лейкопении. Следует особо отметить, что на фоне применения эмоксипина в ткани опухоли развивалась противоположная картина – усиление окислительных процессов, на фоне снижения активности антиокислитель ных ферментов. Раскрытие механизма этого феномена требует дальнейших исследований. ИтЕРАтУРА бурлакова Е.б., Крашков С.А., храпова Н.Г. Кинетические особенности токоферолов как антиоксидантов. Черноголовка, Грызунов обрецов Г.Е. Альбумин сыворотки крови в клинической медицине. М.: Ириус, 1994. 226 с. Клебанов Г.И., теселкин .О., бабенкова И.в. и др. Антиоксидазная активность сыворотки крови // вестник РАМН. Конюхова С.Г., Маркин С.Г., Конюхова А.А., федорова т.Н. перекисное окисление липидов и методы определения продуктов липопероксидации в биологических средах // Лабораторное дело. 5. Королюк М.А., Иванова Л.И., Майорова И.Г., токарева в.Е. Метод определения активности каталазы // Лабораторное дело. Чевари С., Чаба И., Секей Спектрофотометрический метод определения супероксиддисмутазы // Лабораторное дело. 1981. № 11. С. 678–680. Block K.I., Koch A.C., Mead M.N. et al. Impact of antioxidant supplementation on chemotherapeutic toxicity: a systematic review of the evidence from randomized controlled trials // Int. J. Cancer. 2008. № 15. Р. 1227–1239. 8. Chang D., Wang F., Zhao Y.S., Pan H.Z. Evaluation of oxidative stress in colorectal cancer patients // Biomed. Environ. Sci. 2008. Vol. 21 (4). Р. 286–289. Chen Y., Jungsuwadee P., Vore M. et al . Collateral damage in cancer chemotherapy: oxidative stress in nontargeted tissues // Mol. Interv. 2007. Vol. 7 (3). Р. 147–156. Lawenda B.D., Kelly K.M., Ladas .J. et al. Should supple mental antioxidant administration be avoided during chemotherapy and radiation therapy? // J. Natl. Cancer Inst. 2008. Vol. 100 (11). Р. 11. Looi M.L., Mohd Dali A.Z., Md Ali S.A. et al. Oxidative damage and antioxidant status in patients with cervical intraepithelial neoplasia and carcinoma of the cervix // Eur. J. Cancer Prev. 2008. Vol. 17 (6). Р. 555–560. Moss R.W. Should patients undergoing chemotherapy and radiotherapy be prescribed antioxidants? // Integr. Cancer Ther. 2006. № 5. Р. 63–82. Pan H., Mukhopadhyay P., Rajesh M. et al. Cannabidiol at tenuates cisplatin-induced nephrotoxicity by decreasing oxidative/ nitrosative stress, in�ammation and cell death // J. Pharmacol. Exp. Ther. 2008. № 12. Р. 24–28. Prasad K.N. Multiple dietary antioxidants enhance the ef�cacy of standard and experimental cancer therapies and decrease their toxic ity // Integr. Cancer Ther. 2004. № 3. Р. 310–322. Rajneesh C.P., Manimaran A., Sasikala K.R., Adaikappan P. Lipid peroxidation and antioxidant status in patients with breast cancer // Singapore Med. J. 2008. Vol. 49 (8). Р. 640–643. Simone C.B. 2 , Simone N.L., Simone V., Simone C.B. An tioxidants and other nutrients do not interfere with chemotherapy or radiation therapy and can increase kill and increase survival, part 1 // Altern. Ther. Health Med. 2007. № 13. Р. 22–28. поступила 5.12.09

Приложенные файлы

  • pdf 9665821
    Размер файла: 431 kB Загрузок: 0

Добавить комментарий